rProtein G Seplife 4FF層析介質是藍曉科技自主研發的一種新型親和層析介質，是將重組蛋白G偶聯到4%高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質上，它可用于分離純化細胞培養液或細胞提取物中不同種屬的抗體或抗體的Fc片段。重組蛋白G高流速瓊脂糖層析介質采用多位點活化偶聯，有效減少了配基的脫落，用于lgG單克隆抗體的實驗室規模和工業化大規模純化，能迅速處理大體積樣品，提高生產效率。

使用方法

3.1 裝柱

裝柱按照標準操作規程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度，凝膠裝柱前需要脫氣。

3.2平衡

用2～5個柱床體積的初始緩沖溶液進行平衡，直至pH和電導率保持不變。

3.3上樣

樣品的預處理：樣品需先用0.45μm濾膜過濾，然后上樣，以免堵塞層析柱。上樣量根據樣品的性質和層析介質的量進行選擇，也可通過線性實驗找到最佳上樣量。

3.4洗脫

 一般利用降低pH進行洗脫：如0.1mol/L甘氨酸-HCl，pH3.0。洗脫后，應立刻中和緩沖液，將收集到的抗體溶液中和至中性（pH7.4左右），以維持抗體的生物活性，一般中和液為1mol/L Tris-HCl，pH8.5。

3.5 再生

首先用0.1mol/L，pH3.0檸檬酸鈉緩沖液洗3～5個柱床體積，然后用2～3個柱床體積的平衡緩沖液清洗，最后將柱子置于2～8℃環境中。 

3.6在位清洗

（1）對于沉淀或變性物質，可先用2倍柱床體積的6mol/L的鹽酸胍溶液進行清洗，然后用5倍柱床體積的PBS，pH7.4清洗，直至pH和電導保持不變。

（2）對于強疏水性蛋白、脂蛋白和脂質等，可先用3～4倍70%乙醇或2倍柱床體積的非離子去污劑（濃度0.1%）清洗，在37℃洗柱子1min，最后立即用平衡液洗5個柱床體積，直至pH和電導保持不變。

3.7存儲

密封保存在4~8℃（保存溶液為20%乙醇）干燥、通風、清潔處，不可冷凍；用過的柱子保存在4~8℃，20%乙醇溶液中。

3.8運輸

運輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴禁與有毒、有害物品混運。

4.注意事項

（1）該介質從冷室或冰箱中取出后最好在室溫下恢復到室溫，然后緩慢搖勻后裝柱，以免產生氣泡影響柱效。

（2）裝柱時盡可能維持長徑比5：3~2：1，長徑過大將導致洗脫峰拖尾，洗脫體積增大；長徑過小將導致樣品和介質接觸時間過少，吸附不充分，介質吸附蛋白量小。

（3）若上樣液中抗體濃度過高，應用平衡緩沖液稀釋至1~2mg/ml，以免上樣濃度過高影響柱效。

（4）凝膠用低pH緩沖液洗脫的時間應盡可能短，洗脫后用中性緩沖液盡快洗到pH中性，以延長介質的使用壽命。

（5）通常介質使用后應用0.1M檸檬酸鈉緩沖液（pH3.0）做再生處理，然而長期采用極端的洗脫條件會縮短介質的使用壽命。

生產日期：見標簽

使用期限：在適當的貯藏條件下可貯藏5年

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